Метод определения активности церулоплазмина

Материалы » Антиоксидантная система при внутриутробной гипоксии плода » Метод определения активности церулоплазмина

Активность церулоплазмина определяли модифицированным методом Ревина, который базируется на окислении p-фенилендиамина при участии этого фермента. Ферментативную реакцию останавливают добавлением фтористого натрия. По оптической плотности образующихся продуктов судят о концентрации церулоплазмина.

В пробирки вносили по 0,1 мл гомогената. В контрольную пробу добавляли 2 мл раствора NaF (с целью инактивации ферментативной активности церулоплазмина). Затем в контроль и опыт добавляли по 8 мл ацетатного буфера и по 1 мл р-фенилендиамина (используемого в качестве субстрата). Пробирки встряхивали и инкубировали 1 час при температуре, равной +370С.

После инкубации во все пробирки, за исключением контрольной, доливали по 2 мл раствора фтористого натрия. Содержимое пробирок перемешивали и переносили в холодильник, где выдерживали в течение 30 минут при +40С.

Пробы колориметрировали на КФК-2 при λ=530 нм. Результаты сравнивали с данными контрольной пробы. Значение оптической плотности умножали на коэффициент пересчета 875.


Это интересно:

Лактозопермеаза из е. Соli
Этот комплекс изучен наиболее полно из всех симпортных белков. Он кодируется lacY-геном, который является частью lac-оперона, и его часто называют lac-пермеазой. Ген lacY был клонирован и секвенирован, и из штамма-сверхпродуцента был выде ...

Список сокращений
АО - антиоксиданты АКМ – активные кислородные метаболиты АС - атеросклероз БОТ – бутилокситолуол ВЖР – высокожировой рацион ГМК - гладкомышечные клетки ДК – диеновые коньюгаты ИА - индекс атерогенности ЛНП – липопротеиды низкой пл ...

Редкие виды семейство Розоцветные Пензенской области
К редким растениям сем. Розоцветные Пензенской области относятся: 1. Кизильник черноплодный 2. Куманика (подсемейство Спирейные) 3. Лапчатка белая (подсемейство Спирейные) 4. Миндаль низкий (подсемейство Сливовые) 5. Спирея городчата ...