Буфер «А» (Tris 50 mM, EDTA 0.5 mM pH 7.4; 125 мкл 2-меркаптоэтанола на 250 мл буфера после доведения рН)

Буфер «Б» (1М КСl в буфере «А»). Из него готовили ступенчатый градиент: 50, 100, 150, 200, 250, 300, 500 мМ КСl.

Взвешивалили DEAE-целлюлозу из расчета 1 г целлюлозы на 1 мл колонки. Целлюлозу промывали три раза деионизированной водой, затем буфером «А». Наносили на колонку. Промывали буфером «А» после нанесения.

Супернатант наносили на колонку c DEAE-целлюлозой (высота 2 см, объем 2 мл), предварительно уравновешенную буфером «А». После нанесения белков колонку промывали двойным объемом буфера «А» (Tris 50 мM, EDTA 0.5 мM pH 7.4).

Белки элюировали градиентом KCl: 50, 100, 150, 200, 250, 300, 500 мМ. Собирали по две фракции каждой концентрации соли. Каждая фракция по 2 мл. Полученные фракции проверяли на электрофорезе в ПААГ.

Это интересно:

Цикл развития лентеца широкого
Лентец широкий в половозрелом состоянии живёт в кишечнике человека и хищных животных, промежуточных хозяев 2: первый – веслоногие рачки (циклопы), второй – рыбы, гл образом щуки. Длина взрослого червя до 15 м. Стробила широкая, из 3-4 тыс ...

Миология.
Скелетные мышцы. Общая и функциональная анатомия мышц. Поперечнополосатая мышечная ткань. Мышечное волокно (мион)–основной элемент поперечнополосатой (скелетной) мышечной ткани, его форма и размеры. Соедините6льный (система миофибрилл), т ...

Лес …
Это деревья (крупн. мн. раст. с твердым стеблем, ветвями и корнями. Живут 100-150 лет. Высота 7 и более 20 м), кустарники (мн древ раст, ветвящиеся на поверхн. земли. Высота 2-5 м. Живут 10-30 лет), кустарнички (низкоросл мн. раст. с ветв ...