Определение параметров дыхания с помощью кислородного электрода Кларка

Среда для электрода (рН 7.4):

150 мМ сахароза; 50 мМ хлорид калия; 5 мМ дигидрофосфат натрия; 0.5 мМ хлорид магния; 10 мМ хепес. Использовали прибор «Record 4».

Калибровку шкалы выполняли по двум точкам. «Ноль» нмоль кислорода устанавливали при добавлении дитионита натрия (несколько мкг), так как дитионит является сильным восстановителем. 250 нмоль кислорода соответствует содержанию кислорода в среде дыхания объемом 1 мл.

В ячейку добавляли 1 мл среды. 1 мМ Rotenon, 5 мМ сукцинат, митохондрии, 200 мкМ АДФ, ДНФ (5 мкл).

Программа автоматически рассчитывает скорость дыхания.

Скорости: до добавления АДФ, после добавления АДФ, после фосфорилирования АДФ, после добавления разобщителя измеряли на самом прямом участке.

Пересчитывали скорость дыхания на миллиграмм белка митохондрий.


Это интересно:

Находки Восточно-Африканского региона.
1959 год. Экспедиция Льюиса Лики. Танзания, Олдувайское ущелье, дно пересохщего солоноватого озера. Самый древний слой – 2 млн-1,7 млн лет. В 1959 году были найдены остатки посткраниального скелета (голень) и череп, принадлежавшие разным ...

Действие низкочастотной вибрации на клетки и ткани организма
Физическая природа звука и вибрации одна и та же. В обоих случаях речь идет об упругих колебаниях, волнообразно распространяющихся в среде газообразной, жидкой и твердой. Вместе с тем, как мы уже отмечали, биологический эффект действия зв ...

Семейство Ластоногие. Байкальская нерпа
Происхождение байкальской нерпы до сего времени не выяснено. Вероятно, она проникла в озеро еще в третичное время через систему существовавших тогда крупных, связанных между собой и с морем внутренних бассейнов, одним из членов и последни ...