Среда для электрода (рН 7.4):

150 мМ сахароза; 50 мМ хлорид калия; 5 мМ дигидрофосфат натрия; 0.5 мМ хлорид магния; 10 мМ хепес. Использовали прибор «Record 4».

Калибровку шкалы выполняли по двум точкам. «Ноль» нмоль кислорода устанавливали при добавлении дитионита натрия (несколько мкг), так как дитионит является сильным восстановителем. 250 нмоль кислорода соответствует содержанию кислорода в среде дыхания объемом 1 мл.

В ячейку добавляли 1 мл среды. 1 мМ Rotenon, 5 мМ сукцинат, митохондрии, 200 мкМ АДФ, ДНФ (5 мкл).

Программа автоматически рассчитывает скорость дыхания.

Скорости: до добавления АДФ, после добавления АДФ, после фосфорилирования АДФ, после добавления разобщителя измеряли на самом прямом участке.

Пересчитывали скорость дыхания на миллиграмм белка митохондрий.

Это интересно:

Организация мегамира и микромира
Микромир – это мир атомов и элементарных частиц. Наряду с углублением познания в область микромира для науки XX века характерно стремление к изучению объектов мегамира – галактик, Вселенной. Мегамир – мир наиболее знакомых нам объектов « ...

Современная (эволюционная) естественнонаучная картина мира
В XIXв обнаружена несостоятельность научной картины мира, термодинамика провозгласила парадоксальный вывод: «если бы мир был гигантской машиной, то такая машина, должна была остановиться, так как должна остановиться, т.к. запас полезной э ...

Многообразие ядов и механизм их действия
Летальные дозы некоторых ядов: Белый мышьяк60,0мг\кг Мускарин (яд мухоморов) 1,1мг\кг Стрихнин0,5мг\кг Яд гремучей змеи0,2мг\кг Яд кобры0,075мг\кг Зорин (боевое ОВ) 0,015мг\кг Палитоксин (токсин морских кишечнополостных) 0,00015мг\ ...