Материалы и методы. Выделение белка с молекулярной массой 55 кДа из митохондрий печени крыс

Материалы » Участие митохондриального АТФ-ингибируемого калиевого канала в адаптации животного к гипоксическому состоянию » Материалы и методы. Выделение белка с молекулярной массой 55 кДа из митохондрий печени крыс

В работе использовали самцов крыс линии Вистар.

Для выделения белка проводили выделение митопластов, экстракцию белков из митопластов, отделение водорастворимых белков от нерастворимых в воде. Дальнейшее разделение водорастворимых белков осуществляли методом ионообменной хроматографии, с повторным проведением хроматографии фракций, где был обнаружен белок с Мr 55 кДа. Фракции после хроматографии проверяли с помощью SDS-электрофореза и, если было необходимо, на приборе для определения проводимости бислойных липидных мембран. Далее проводили нативный форез фракций после повторной хроматографии, в которых с помощью SDS-фореза был обнаружен белок с Мr 55 кДА и концентрирование белка методом обратного диализа с помощью полиэтиленгликоля (ПЭГ).


Это интересно:

Практическая работа «влияние рекреационной нагрузки на структуру почвы»
Цель: оценить влияние рекреационной нагрузки на структуру почвы. Введение: Под рекреационной нагрузкой подразумевают комплексное воздействие отдыхающих людей на природные экосистемы. Вытаптывание – основной процесс нарушения природной с ...

Универсальные механизмы возникновения и развития катастрофических событий
Катастрофические события, как ранее было сказано, происходят в сложных системах. Теперь я лишь хочу уточнить, что эти системы инвариантны относительно изменений масштаба и состоят из других систем. Чтобы описать теорию самоорганизованной ...

Креатинфосфатный путь ресинтеза АТФ (офеатинкиназный, алактатный)
В мышечных клетках всегда имеется креатинфосфат - соединение, содержащее фосфатную группу, связанную с остатком креатина макроэнергической связью. Содержание креатинфосфата в мышцах в покое - 15-20 ммоль/кг. Креатинфосфат обладает большим ...