Изучение параметров АТФ-зависимого транспорта ионов калия в митохондриях

Исследование параметров проводилось на двух моделях:

А) Модель энергозависимого набухания митохондрий.

Увеличение концентрации ионов К+ матриксе провоцирует осмотически облигатное поступление воды и, следовательно, набухание митохондрий. Изменение объема митохондрий влияет на их оптическую плотность. Следовательно, активность канала можно определить методом динамической спектрофотометрии.

Скорость энергозависимого входа ионов К+ определялась у крыс с различной устойчивостью, а также адаптированных к гипоксии крыс. Данные представлены в таблице 6.

Из полученных данных следует, что скорость энергозависимого транспорта К+ значительно выше у высокоустойчивых и адаптированных к гипоксии крыс по сравнению с низкоустойчивыми животными.

Субстрат

Показатель

НУ

А

ВУ

Сукцинат

Скорость, DD/мин*мг белка МХ

0.452+0.074

0.566+0.146

0.626+0.122

Малат + глутамат

Скорость, DD/мин*мг белка МХ

0.339+0.032

0.548+0.038

0.537+0.156

Таблица 6. Энергозависимый вход калия в митохондрии печени животных с различной устойчивостью к гипоксии, а также адаптированных к гипоксии животных.

Б) Модель энергозависимого набухания митохондрий.

При сильном разобщении митоК+АТФ способен опосредовать выход ионов К+ из матрикса, то есть обращать свою работу, наблюдаемую в физиологических условиях. Показано, что эта активность ингибируется АТФ, что доказывает специфичность выхода ионов К+ в данной модели именно через этот канал.

Скорость выхода катионов К+ определялась у всех групп крыс.

Данные полученные на модели ДНФ-индуцируемого выхода ионов К согласуются с данными, полученными на модели энергозависимого набухания митохондрий. То есть, указывают на изначально большую активность канала у высокоустойчивых крыс и повышение активности канала при адаптации. Данные представлены в таблице 7.

Таблица 7. Скорость ДНФ-индуцируемого выхода К+ из митохондрий печени животных с различной устойчивостью к гипоксии, а также адаптированных к гипоксии животных.

Животные

Скорость, мкМ / мин*мг белка митохондрий

Скорость после добавления 800 мкМ АТФ, мкМ / мин*мг белка

А

73.256±3.54

3,782±3.211

ВУ

70,02±3.76

6,18±3.742

НУ

42,309±3.86

3,537±2.349


Это интересно: