Приготовление образцов ДНК
Страница 3

8. PSG

Этот раствор используется для отмывки простейших перед лизисом. Конечные концентрации На 1 л

75 мМ Na-фосфатный буфер 75 мл 1 М раствора

65 мМ NaCI 13 мл 3 М раствора

10% глюкоза 100 г.

Проавтоклавируйте.

Организм

Концентрация клеток в 100 мкл блок-вставки

Нагрузка на дорожку при форезе

Trypanosoma brucei Plasmodium falciparum Giardia lambia Leishmania

2х10х10 1Х10 2х10

1/16

1/8

1/10

1/16

Известно, что хромосомная ДНК из-за больших размеров молекулы чрезвычайно чувствительна к воздействию нуклеаз. В связи с этим необходимо принять за правило предварительно обрабатывать все растворы, контактирующие с ДНК. Растворы следует разлить на небольшие порции и простерилизовать. Стерильными должны быть и посуда, и оборудование. Для переноса образцов из вставок или из трубочек можно использовать изогнутую стеклянную палочку, простерилизованную в спирте и в пламени горелки. При работе с образцами ДНК нельзя пользоваться никакими приспособлениями, содержащими металлические детали, в частности из нержавеющей стали, а также шпателями и бритвенными лезвиями. ДНК прочно связывается со многими бивалентными металлами и контакт с ними обычно приводит к появлению разрывов в молекуле ДНК.

Страницы: 1 2 3 


Это интересно: