Определение концентрации общего холестерина (ХСобщ) в сыворотке и плазме крови энзиматическим колориметрическим методом
ПРИНЦИП МЕТОДА. При гидролизе ЭХС холестеразой образуется свободный ХС. Образуется и имеющийся в пробе ХС: окисляется кислородом воздуха под действием холестеролоксидазы с образованием эквимолярного количества перекиси водорода. Под действием (РОД) перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации в пробе.
Набор
реагентов
:
CHOLESTEROL
«
E
–
D
» («
Vital
-
Diagnostics
»)
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
|
Реагенты |
Опытные пробы,(мл.) |
Калибровочные пробы, (мл.) |
Контрольные пробы, (мл.) |
|
Сыворотка или плазма |
0,02 |
_ |
_ |
|
Физ. Раствор (H2O) |
_ |
_ |
0,02 |
|
Реагент 2 |
2,0 |
2,0 |
2,0 |
|
Раствор холестерина |
_ |
0,02 |
_ |
Реакционную смесь перемешивают и инкубируют не менее 5 мин при комнатной температуре (20-25°С) или при 37°С и измеряют оптическую плотность опытных и калибровочных проб против контрольной пробы в кювете с толщиной поглощающего слоя 5 см (1 см.) при длине волны 500 нм (ФЭК- 490 нм). Окраска стабильна не менее 2-х часов после окончания инкубации при предохранении от прямого солнечного света.
Расчет концентрации холестерина проводят по формуле:
С = [Ео/Ест ] * 5,17 (ммоль/л) или С =[ Ео/Ест ] * 200 (мг/100 мл)
Ео и Ест – экстинция образца и стандарта, измеряется относительно контрольной пробы.
Это интересно:
Обзор литературы. Биохимические изменения в тканях при
зимней спячке
Зимняя спячка (гибернация) – это закрепленная в ходе эволюции уникальная способность к минимализации жизненных функций организма, позволяющая ряду видов млекопитающих в течение многих месяцев переживать холод, бескормицу, сокращения светл ...
Раскройте понятие «биосфера», укажите ее функции и
характеризуйте ее оболочки. Как это понятие было переосмыслено В.И.Вернадским?
Существование биосферы Земли как определенной природной системы выражается в первую очередь в круговороте энергии и веществ при участии всех живых организмов. Идея этого круговорота была изложена в книге немецкого натуралиста Я. Молешотта ...
Старость и старение. Основные понятия. Причины
старения населения
Старение является неизбежным элементом развития как отдельных людей, так и всего населения. В развитии человека, общества можно выделить периоды молодости, зрелости, старости, а также глубокой старости. Границы между двумя последними пери ...