Определение концентрации триглицеридов (ТГ) в сыворотке и плазме крови энзиматическим колориметрическим методом
Тглицериды липаза глицерин + жирная кислота
Глицерин + АТФ глицерокиназа глицерил-3-фосфат +2 H2O
Глицерил-3-фосфат + O2 ГФО диоксиацетон фосфат +2 H2O
H2O2 + 4-ААР + 4-хлорфенол пероксидаза хинонимин + 4H2O
Набор
реагентов
: TRIGLYCERIDES «E – D» («Vital-Diagnostics»)
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
|
Реагенты |
Опытные пробы, (мл.) |
Калибровочные пробы, (мл.) |
Контрольные пробы, (мл.) |
|
Сыворотка или плазма |
0,02 |
_ |
_ |
|
Физ. Раствор (H2O) |
_ |
_ |
0,02 |
|
Реагент |
2,0 |
2,0 |
2,0 |
|
Стандартный раствор |
_ |
0,02 |
_ |
Реакционную смесь перемешивают и инкубируют не менее 5 мин при комнатной температуре (20-25°С) и измеряют оптическую плотность опытных и калибровочных проб против контрольной пробы в кювете с толщиной поглощающего слоя 5 см (1 см.) при длине волны 505 нм (ФЭК- 490 нм). Окраска стабильна не менее часа после окончания инкубации при предохранении от прямого солнечного света. (таблица).
Расчет концентрации триглицеридов проводят по формуле:
С = [Ео/Ест *250] – 10 (мг/100мл) или С = [Ео/Ест *2,85] – 0,11ммоль/л
Ео и Ест – экстинция образца и стандарта, измеряется относительно контрольной пробы. 10 мг/100мл (0,11ммоль/л) – поправка на содержание свободного глицерина в сыворотке (плазме крови).
Это интересно:
Подготовка биологического материала для
биохимического и гистологического исследования
После окончания эксперимента животных выдерживали 12 часов без корма, затем наркотизировали тиопенталом натрия в дозе 6 мг на 100 г веса. После чего вскрывали брюшную полость, пунктировали брюшную аорту и собирали кровь в пробирки с гепар ...
Проблемы клонирования человека
Возможность клонирования человека общественным мнением воспринимается неоднозначно, существуют обоснованные мнения «за» и «против». Примечательно, что вновь столкнулись позиции научных кругов и духовенства, выражающих полярные точки зрени ...
Общая схема региональной дифференцировки
Рострокаудальный и дорзовентральный градиенты факторов транскрипции определяют локальную идентификацию клеток в пределах ЦНС. Эти же факторы способны приводить к развитию довольно различных свойств в зависимости от того, в каком месте эмб ...